2018年21期

擬南芥SSP1基因GFP載體構建及GFP植株篩選

作  者 吳席,樊婷婷,方雪,徐潔娜,曹樹青
第一作者 吳席
作者單位 合肥工業大學食品科學與工程學院,安徽合肥
卷  號 46
發表年份 2018
發表刊期 21
發表頁面 119-121
關  鍵  字 擬南芥;SSP1;載體;GFP轉基因植株,
摘  要 [目的]以野生型擬南芥為材料構建SSP1基因GFP載體及GFP轉基因植株。[方法]通過提取野生型擬南芥的RNA,反轉錄成為cDNA,并以cDNA為模板,利用高保真酶,進行SSP1基因的克隆,將克隆所獲得SSP1基因和pXB94-GFP質粒進行雙酶切,利用T4-DNA ligase進行連接,并轉化進大腸桿菌DH5α感受態細胞中,通過菌落PCR和測序獲得陽性單克隆。通過質粒抽提試劑盒提出構建好的重組質粒,并將其轉入農桿菌GV3101中,通過菌落PCR鑒定出陽性單菌落。將獲得的陽性菌通過花序浸染法轉入野生型擬南芥中,并通過抗性篩選獲得陽性植株。[結果]克隆SSP1基因成功,菌落PCR顯示SSP1基因成功連接到pXB94-GFP質粒上并成功轉入農桿菌中,抗性篩選獲得了SSP1-GFP轉基因植株。 [結論]成功獲得SSP1-GFP轉基因植株,為接下來進一步研究SSP1基因功能奠定了基礎。
附  件 擬南芥SSP1基因GFP載體構建及GFP植株篩選
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