作 者 | 吳席,樊婷婷,方雪,徐潔娜,曹樹青 |
第一作者 | 吳席 |
作者單位 | 合肥工業大學食品科學與工程學院,安徽合肥 |
卷 號 | 46 |
發表年份 | 2018 |
發表刊期 | 21 |
發表頁面 | 119-121 |
關 鍵 字 | 擬南芥;SSP1;載體;GFP轉基因植株, |
摘 要 | [目的]以野生型擬南芥為材料構建SSP1基因GFP載體及GFP轉基因植株。[方法]通過提取野生型擬南芥的RNA,反轉錄成為cDNA,并以cDNA為模板,利用高保真酶,進行SSP1基因的克隆,將克隆所獲得SSP1基因和pXB94-GFP質粒進行雙酶切,利用T4-DNA ligase進行連接,并轉化進大腸桿菌DH5α感受態細胞中,通過菌落PCR和測序獲得陽性單克隆。通過質粒抽提試劑盒提出構建好的重組質粒,并將其轉入農桿菌GV3101中,通過菌落PCR鑒定出陽性單菌落。將獲得的陽性菌通過花序浸染法轉入野生型擬南芥中,并通過抗性篩選獲得陽性植株。[結果]克隆SSP1基因成功,菌落PCR顯示SSP1基因成功連接到pXB94-GFP質粒上并成功轉入農桿菌中,抗性篩選獲得了SSP1-GFP轉基因植株。 [結論]成功獲得SSP1-GFP轉基因植株,為接下來進一步研究SSP1基因功能奠定了基礎。 |
附 件 |
擬南芥SSP1基因GFP載體構建及GFP植株篩選![]() |
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