2018年21期

一個耐鎘基因過表達載體構建及轉基因植株的篩選鑒定

作  者 嚴星星,歐陽劍,黃 瑩,盛義保,張 乘,曹樹青
第一作者 嚴星星
作者單位 合肥工業大學食品科學與工程學院,安徽合肥
卷  號 46
發表年份 2018
發表刊期 21
發表頁面 116-118
關  鍵  字 擬南芥;MNB1基因;過表達;轉基因植株,
摘  要 [目的]進一步研究MNB1基因在植物應對鎘脅迫響應中的功能,構建擬南芥中MNB1基因過量表達載體,通過篩選鑒定最終獲得相應的轉基因植株。[方法]以野生型擬南芥cDNA為模板,PCR擴增MNB1基因全長,將該基因連接到過量表達載體上;然后將構建成功的重組載體轉化至農桿菌菌株GV3101,浸花法轉化野生型植株;最后利用轉基因篩選與遺傳鑒定獲得MNB1轉基因陽性植株。[結果]MNB1基因CDS全長1 368 bp,酶切連接后轉化大腸桿菌鑒定得到陽性菌落,測序結果經比對完全正確。通過抗性篩選及PCR電泳檢測獲得陽性轉基因植株。[結論]MNB1基因過表達載體構建成功并獲得相應轉基因植株,為進一步研究該基因調控植物鎘脅迫響應中的功能及其分子機制奠定基礎。
附  件 一個耐鎘基因過表達載體構建及轉基因植株的篩選鑒定
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