2016年03期

蜂蜜蛋白提取以及雙向電泳技術分析蜂蜜蛋白條件優化

作  者 周莉質,宗凱,呂俠影,余曉峰,姚劍
第一作者 周莉質
作者單位 安徽出入境檢驗檢疫局,安徽合肥
卷  號 44
發表年份 2016
發表刊期 3
發表頁面 85-87,95
關  鍵  字 蜂蜜蛋白;雙向電泳;蛋白提取,
摘  要 [目的]研究蜂蜜中蛋白質提取的有效方法,優化蜂蜜蛋白電泳條件。[方法]該試驗使用丙酮、鎢酸鈉、硫酸銨、尿素-硫脲4種方法提取蜂蜜中的蛋白并進行比較,然后進行雙向電泳分析,對影響雙向蛋白電泳的IPG膠條的選擇、蛋白質上樣量、等電聚焦時間等主要因素進行優化。[結果]試驗表明,采用硫脲法提取蜂蜜蛋白獲得的蛋白含量最高,硫脲法和丙酮沉淀法獲得的蛋白純度最好,而硫脲法因干擾物質較少、易于裂解適于雙向電泳技術,采用硫脲法提取的蜂蜜蛋白選擇IPG膠條pH 5~8,蛋白上樣量為150 μg,等電聚焦時間達到32 000 V·h的情況下能充分地聚焦,獲得的雙向電泳圖譜最佳,優化后的洋槐蜜雙向電泳圖譜上可檢測到326個蛋白點,重復性和分辨率均較好。[結論]蜂蜜類含糖樣品中使用硫脲法提取蛋白能減少糖類物質干擾。
附  件 蜂蜜蛋白提取以及雙向電泳技術分析蜂蜜蛋白條件優化
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