2018年30期

柯薩奇病毒A組16型VP1蛋白的原核表達及純化

作  者 潘朋歌,李克生,杜惠芬,曾潮寧
第一作者 潘朋歌
作者單位 寧夏醫科大學,寧夏銀川
卷  號 46
發表年份 2018
發表刊期 30
發表頁面 99-101
關  鍵  字 柯薩奇病毒A組16型(CVA16);VP1蛋白;原核表達;純化,
摘  要 [目的]原核表達并純化柯薩奇病毒A組16型(CVA16)VP1蛋白。[方法]根據GenBank CVA16 VP1基因序列,合成VP1全基因,連接到載體pET30a,構建原核表達質粒pET30a-CVA16-VP1。將測序正確的重組質粒轉化至大腸桿菌BL21(DE3),IPTG誘導蛋白表達,Ni-NTA親和層析純化,SDS-PAGE和Western Blot鑒定重組蛋白。[結果]成功構建重組質粒pET30a-CVA16-VP1,表達蛋白經SDS-PAGE顯示分子量約為38.7 kDa,目的蛋白以包涵體形式存在,蛋白經復性、純化,純度達90%以上;經Western Blot檢測,證實表達的蛋白為VP1蛋白。[結論]成功獲得了高純度的VP1蛋白,為此抗原用于臨床診斷打下了基礎。
附  件 柯薩奇病毒A組16型VP1蛋白的原核表達及純化
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