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2016年02期
細菌性條斑病菌JH01誘導水稻抗病均一化差減文庫的構建
| 作 者 | 凌丹燕， 路梅 |
| 第一作者 | 凌丹燕 |
| 作者單位 | 浙江師范大學化學與生命科學學院，浙江金華 |
| 卷 號 | 44 |
| 發表年份 | 2016 |
| 發表刊期 | 2 |
| 發表頁面 | 188-191 |
| 關 鍵 字 | 細菌性條斑病;水稻；雙鏈特異性核酸酶（DSN）；均一化差減雜交；熒光定量PCR, |
| 摘 要 | ［目的］ 構建細菌性條斑病菌誘導下的水稻抗病均一化差減cDNA文庫，對獲得的差異表達ESTs進行生物信息學及抗病相關基因的表達分析。 ［方法］以水稻IR26（Tester）和兩優培九（Driver）幼苗5~6葉期葉片為材料，采用雙鏈特異性核酸酶（DSN）介導的均一化消減雜交技術，構建細菌性條斑病菌JH01誘導的水稻抗病相關基因差減cDNA文庫，以pLBF和pLBR為引物，通過菌液PCR擴增對差減文庫的質量進行檢測。［結果］ cDNA文庫的插入片段分布在 0.5~2.0 kb，平均大小約為1.0 kb，重組率達 95%。序列測定分析發現，隨機挑取的504個克隆中有98 條差異表達基因；經 BLAST 比對和GO 注釋發現，59 條序列具有同源基因，分別參與信號轉導、能量代謝、過敏性壞死反應、防衛反應等；另外 39 條序列無相似基因，有待進一步研究。通過實時熒光定量PCR發現，從該文庫中分離得到的OsNDPK4參與細菌性條斑病菌JH01誘導的水稻防衛反應。［結論］水稻受細菌性條斑病菌侵染的 cDNA文庫質量較好，為研究條斑病菌致病性因子與水稻互作機制奠定基礎。 |
| 附 件 |
細菌性條斑病菌JH01誘導水稻抗病均一化差減文庫的構建
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