作 者 | 郭建軍,袁林,曾靜,魏國汶,楊一兵 |
第一作者 | 郭建軍 |
作者單位 | 江西省科學院微生物研究所,江西南昌 |
卷 號 | 44 |
發表年份 | 2016 |
發表刊期 | 2 |
發表頁面 | 184-187 |
關 鍵 字 | 桿狀病毒;多角體;異源包埋, |
摘 要 | [目的]探索多角體病毒的包裝特性,構建能形成多角體包裹外源蛋白的polyh+BactoBac表達系統。[方法] 通過酶切連接的方式,將4個元件片段:作為標記的綠色熒光基因EGFP,BmCPV自身的多角體蛋白基因,用于基因表達的H1信號肽柔性連接肽, 插入到質粒FastBacDual 中,利用AcMNPV BactoBac系統,得到整合表達重組Bacmid:Acpolyh/EGFP。將其感染Sf9細胞后,檢測蛋白表達情況。[結果]利用該系統構建了一種能大量表達綠色熒光蛋白(EGFP)和能在胞質形成多角體的重組病毒vBmBac(polyh+)EGFP。感染的Sf9細胞在熒光顯微鏡下觀察發現EGFP與多角體可以在同一細胞中同時表達;從感染的Sf9細胞中收集純化多角體,觀察到多角體能被激發出綠色熒光,進一步利用Western blot證實多角體中含有EGFP。[結論]該表達系統為解決活性蛋白長期保存提供了新方法,同時拓寬了桿狀病毒在開發含有毒素蛋白的新型生物殺蟲劑和新型疫苗的轉運載體等領域的應用前景。 |
附 件 |
多角體包埋異源蛋白桿狀病毒表達系統的構建![]() |
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