2022年01期

UdhA和博伊丁假絲酵母xylI基因共表達對木糖醇發酵的影響

作  者 唐梅,蔡松,付聲亮,王金華,王永澤
第一作者 唐梅
作者單位 湖北工業大學工業微生物教育部重點實驗室,湖北武漢
卷  號 50
發表年份 2022
發表刊期 1
發表頁面 106-109
關  鍵  字 博伊丁假絲酵母;xylI基因;UdhA基因;共表達;木糖醇
摘  要 [目的]研究可溶性吡啶核苷酸轉氫酶基因(UdhA)和醛糖還原酶基因(xylI)共表達對木糖醇發酵的影響。[方法]將來源于博伊丁假絲酵母醛糖還原酶xylI基因克隆到pET28a(+)上,并在BL21(DE3)中表達,通過SDS-PAGE對表達產物的分子量和酶活進行測定。隨即將xylI基因連接lacP啟動子,構建pWYZ-2質粒并將其轉化到E.coli AI07菌株。進一步將來源于E.coli W3110的UdhA基因克隆到pWYZ-2質粒實現與xylI共表達,所構建pWYZ-4質粒轉化到E.coli AI07菌株,比較了E.coli AI07/pWYZ-2和E.coli AI07/pWYZ-4木糖醇發酵結果。[結果]在BL21(DE3)/pET28a(+)體系誘導表達的醛糖還原酶分子量為39  kD,木糖還原酶酶活為3.30 U/mL。E.coli AI07/pWYZ-2菌株發酵48 h,木糖醇產量為19.90 g/L;E.coli AI07/pWYZ-4發酵36 h,木糖醇產量達到19.91 g/L,較菌株AI07/pWYZ-2生產強度提高了33.25%。[結論]通過將UdhA基因與xylI 基因進行共表達,提高了重組大腸桿菌(E.coli AI07/ pWYZ-4)合成木糖醇的生產強度。
附  件 UdhA和博伊丁假絲酵母xylI基因共表達對木糖醇發酵的影響
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