2021年23期

不同方法對STO細胞凍存效果的影響

作  者 譚 菊,武彩紅,文潮潮,王 萌
第一作者 譚 菊
作者單位 江蘇農牧科技職業學院,江蘇泰州
卷  號 49
發表年份 2021
發表刊期 23
發表頁面 130-132,139
關  鍵  字 STO細胞;冷凍保存;存活率;生長
摘  要 [目的]建立一種更優化的STO細胞冷凍保存方法。[方法]STO細胞傳至第3代后,調節其濃度至 2.09×105個/mL,開展冷凍保存試驗。Ⅰ組將STO細胞置于4 ℃下平衡,1 h后轉入-20 ℃下,12 h后將其轉至液氮中保存;Ⅱ組將STO細胞裝入已注入250 mL 95%乙醇的降溫器后,立即轉至-70 ℃下,12 h后再將其轉至液氮中保存;Ⅲ組將STO細胞懸液于液氮面上方10 cm處平衡20 min,然后將其緩緩轉至液氮中。同時,設Ⅳ組為對照組,即STO細胞不進行冷凍處理。在液氮中保存30 d后進行解凍,以STO細胞的回收率、存活率和生長情況為研究指標,通過MTT法進行STO細胞凍存效果評價。[結果]經冷凍處理后,3種方法STO細胞解凍后回收率和存活率均存在顯著差異(P<0.05)。Ⅱ組細胞解凍后細胞回收率低于Ⅰ組、高于Ⅲ組,但細胞存活率最高(84.91%)。與Ⅰ組和Ⅲ組相比,Ⅱ組STO細胞凍存方法不僅能保證冷凍效果,而且可以回收更多的細胞。Ⅱ組STO細胞復蘇后生長相對緩慢,但STO細胞經培養后可恢復至冷凍前的生長狀態。Ⅰ組和Ⅱ組復蘇后STO細胞的增殖速度較快,且增殖率基本相同,而Ⅲ組細胞的增殖速度較慢。[結論]Ⅱ組STO細胞于-70 ℃冰箱中平衡過夜,再轉移至液氮中超低溫冷凍是較為理想的保存方法。
附  件 不同方法對STO細胞凍存效果的影響
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