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2019年12期
豬繁殖與呼吸綜合征病毒非結構蛋白1α多克隆抗體的制備及應用
| 作 者 | 趙慧君，趙旭陽，史西保，陳靜，范小敏，司朝朝，王麗，李青梅，常曉博，李雪瑩，付建蒙，徐雅甜，鄧瑞廣，張改平 |
| 第一作者 | 趙慧君 |
| 作者單位 | 河南農業大學生命科學學院 |
| 卷 號 | 47 |
| 發表年份 | 2019 |
| 發表刊期 | 12 |
| 發表頁面 | 115-119,131 |
| 關 鍵 字 | PRRSV;nsp1α;多克隆抗體 |
| 摘 要 | 以真核質粒pcDNA3.1-flag-nsp1α為模板，利用PCR擴增出nsp1α基因片段，構建原核重組載體pET32a-nsp1α，轉化到大腸桿菌BL21(DE3)感受態，1 mmol/L IPTG在37 ℃誘導表達6 h，成功獲得以包涵體形式存在的重組蛋白，能夠與小鼠抗His標簽單克隆抗體反應；包涵體復性后作為抗原免疫新西蘭大白兔，3次免疫后20 d獲得兔多抗血清。通過間接ELISA、Western blot、間接免疫熒光、免疫組化等試驗獲得了高效價的兔多抗血清，該血清能夠特異性地識別真核質粒表達的nsp1α以及PRRSV BJ4株。該試驗成功表達了pET32a-nsp1α重組蛋白，并制備了高效價、高特異性的兔抗nsp1α多克隆抗體。 |
| 附 件 |
豬繁殖與呼吸綜合征病毒非結構蛋白1α多克隆抗體的制備及應用
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