2019年03期

擬南芥CTSP3基因GUS載體構建及轉基因植株的篩選鑒定

作  者 孟云,陶曼芝,吳席,曹樹青,樊婷婷
第一作者 孟云
作者單位 合肥工業大學食品與生物工程學院,安徽合肥
卷  號 47
發表年份 2019
發表刊期 3
發表頁面 84-86
關  鍵  字 擬南芥;CTSP3;載體;轉基因植株
摘  要 [目的]深入研究植物基因CTSP3的基因表達模式及其對重金屬鎘脅迫的響應機制,以野生型擬南芥為材料構建CTSP3-GUS重組質粒及GUS轉基因植株。[方法]通過提取野生型擬南芥的DNA,克隆其啟動區基因片段,將基因片段和pART27-GUS質粒雙酶切后連接,轉化到大腸桿菌感受態細胞中,菌落PCR和測序獲得陽性單克隆。然后將CTSP3-GUS重組質粒轉入農桿菌感受態GV3101,獲得陽性單菌落。接著采用浸花法侵染野生型擬南芥,最后通過抗性篩選和PCR鑒定獲取CTSP3-GUS轉基因植株。[結果]成功克隆CTSP3啟動區基因片段,構建出重組質粒,獲得了CTSP3-GUS轉基因植株。 [結論]獲得CTSP3-GUS轉基因植株,為接下來進一步研究該基因在植物響應鎘脅迫機制中的功能奠定了基礎。
附  件 擬南芥CTSP3基因GUS載體構建及轉基因植株的篩選鑒定
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