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2018年36期
忽地笑α-葡萄糖苷酶2編碼基因的分子克隆與原核表達
| 作 者 | 李宜奎，李潔，程麗，錢彬彬，汪仁 |
| 第一作者 | 李宜奎 |
| 作者單位 | 江蘇省中國科學院植物研究所,江蘇南京 |
| 卷 號 | 46 |
| 發表年份 | 2018 |
| 發表刊期 | 36 |
| 發表頁面 | 78-82,89 |
| 關 鍵 字 | |
| 摘 要 | ［目的］克隆忽地笑［Lycoris aurea (L’Hér.) Herb.］α-葡萄糖苷酶2編碼基因。［方法］ 基于忽地笑的轉錄組數據庫，分析功能注釋為α-葡萄糖苷酶2的基因片段，通過設計特異性定量PCR擴增引物分析其在各組織中的表達豐度，利用RACE (rapidamplification of cDNA ends)技術從高豐度組織中克隆獲得忽地笑α-葡萄糖苷酶2編碼基因。 ［結果］ 忽地笑α-葡萄糖苷酶2編碼基因LauAgl2 cDNA全長3 185 bp，開放閱讀框為2 961 bp，編碼含有986個氨基酸殘基的LauAgl2蛋白質。LauAgl2蛋白質氨基酸序列具有α-葡萄糖苷酶Ⅱ特征性的保守結構域和天冬氨酸殘基組成的活性中心，還具有一些蛋白質糖基化的潛在位點(N-X-S/T共有序列)。LauAgl2蛋白質與油棕、陸地棉等其他植物的α-葡萄糖苷酶2的氨基酸序列一致性為73.0%以上。利用pET表達系統，可以在大腸桿菌中實現LauAgl2蛋白質的誘導表達。［結論］成功從忽地笑花葶和花瓣中克隆到α-葡萄糖苷酶2編碼基因LauAgl2并在大腸桿菌中LauAgl2進行了異源表達，為LauAgl2蛋白質的功能鑒定及其在忽地笑種子萌發與生長發育中的作用研究奠定了基礎。 |
| 附 件 |
忽地笑α-葡萄糖苷酶2編碼基因的分子克隆與原核表達
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