2018年36期

以PMI為選擇標記基因的雪柑遺傳轉化體系的優化

作  者 王會全,吳少華,余志雄
第一作者 王會全
作者單位 福建農業職業技術學院,福建福州
卷  號 47
發表年份 2018
發表刊期 36
發表頁面 83-89
關  鍵  字 柑橘;6-磷酸甘露糖異構酶;遺傳轉化
摘  要 [目的]以PMI為選擇標記基因對雪柑的遺傳轉化體系進行優化。[方法]對農桿菌的菌液濃度、實生苗培養條件、甘露糖篩選壓、2,4-D濃度、2,4-D預處理時間、農桿菌侵染時間、共培養時間進行梯度試驗來研究轉化后的再生率,并對篩選培養基中6-BA和NAA不同濃度組合進行試驗來研究抗性大苗的篩選。[結果]經過暗培養20 d光培養10 d條件的實生苗外植體在農桿菌菌液OD600為0.6,1.0 mg/L 2,4-D預處理3 h,農桿菌侵染30 min,共培養時間4 d,篩選壓為甘露糖20 g/L的情況下轉化后的再生率大大提高,而在篩選培養基中加入2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA有助于抗性大苗的篩選。[結論]通過對影響轉化的各種因素的優化試驗建立了雪柑以PMI基因/甘露糖選擇標記系統的高效遺傳轉化體系。
附  件 以PMI為選擇標記基因的雪柑遺傳轉化體系的優化
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