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2018年33期
重組角質細胞生長因子（KGF）的原核表達及優化
| 作 者 | 田順立，鄭春陽 |
| 第一作者 | 田順立 |
| 作者單位 | 天津醫科大學總醫院保健醫療部，天津 |
| 卷 號 | 46 |
| 發表年份 | 2018 |
| 發表刊期 | 33 |
| 發表頁面 | 71-74 |
| 關 鍵 字 | 角質細胞生長因子（KGF）；原核表達系統；密碼子優化；融合表達；標簽蛋白, |
| 摘 要 | ［目的］在原核表達系統中進行重組人角質細胞生長因子（KGF）的表達及優化。［方法］選取缺失N端23個氨基酸殘基的KGF片段作為目的基因，按照大腸桿菌的密碼子偏好性，將其進行密碼子優化。使用BL21（DE3）菌株表達KGF（ΔN23）、SUMO融合的SUMO-KGF（ΔN23）和Fh8-SUMO融合的Fh8-SUMO-KGF（ΔN23），并測試不同表達溫度（37、23 ℃）對KGF（ΔN23）表達結果的影響。［結果］在BL21（DE3）菌株中，37 ℃表達時KGF（N23），SUMO-KGF（ΔN23）和Fh8-SUMO-KGF（ΔN23）的表達量都較高，其中可溶性蛋白表達量KGF（ΔN23）< SUMO-KGF（ΔN23）< Fh8-SUMO- KGF（ΔN23）。降低誘導溫度為23 ℃后，3種KGF的表達量都顯著降低，但是可溶性蛋白的占比顯著提高，均接近100%。［結論］降低誘導溫度能夠促進KGF的可溶性表達，但是總蛋白的表達水平顯著下降；與可溶性標簽蛋白融合表達能夠提高KGF在37 ℃表達時可溶性蛋白占比，其中融合Fh8-SUMO標簽的KGF表達量和可溶性蛋白占比較高。 |
| 附 件 |
重組角質細胞生長因子（KGF）的原核表達及優化
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