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2017年29期
黃芪甲基化敏感擴增多態性（MSAP）擴增引物篩選及初步應用
| 作 者 | 宗凱，趙營莉，周莉質，李秀秀，宮鵬，夏泉 |
| 第一作者 | 宗凱 |
| 作者單位 | 安徽出入境檢驗檢疫局，安徽合肥 |
| 卷 號 | 45 |
| 發表年份 | 2017 |
| 發表刊期 | 29 |
| 發表頁面 | 149-152 |
| 關 鍵 字 | 黃芪；甲基化敏感擴增多態性；選擇性擴增；聚類分析, |
| 摘 要 | ［目的］建立并優化黃芪甲基化敏感擴增多態性（MSAP）技術擴增反應體系，對中藥材黃芪甲基化水平進行研究。［方法］磁珠法提取黃芪DNA后，采用Hpa II/Msp I 2種內切酶進行酶切，將酶切產物加上連接接頭序列，經預擴增和選擇性擴增反應，最終從黃芪 MSAP的256對引物中篩選出最佳分辨引物4對。應用篩選到的4對引物，分析12種不同產地黃芪的甲基化模式，并對甲基化水平聚類分析。［結果］經MSAP檢測12個黃芪樣本半甲基化率在12.5%~26.7%，全甲基化率在25.6%~51.1%，總甲基化率在48.7%~735%，總體上黃芪樣本的全甲基化率大于半甲基化率。采用NTSYSpc軟件對黃芪樣品Hpa II和Msp I多態性數據進行分析，獲得UPGMA聚類圖和主成分分析PCA圖。［結論］MSAP技術能夠很好地用于黃芪的甲基化分析，結合NTSYSpc軟件能對不同產地黃芪之間甲基化水平進行聚類分析，且初步分析結果表明從UPGMA和PCA圖上來看，地區相近的單株聚類分析表現出了一定的地域性。 |
| 附 件 |
黃芪甲基化敏感擴增多態性（MSAP）擴增引物篩選及初步應用
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