2017年19期

萊茵衣藻MAPK4基因RNAi載體的構建及鑒定

作  者 王子賀,鄧曉東,張陽,費小雯
第一作者 王子賀
作者單位 海南醫學院基礎醫學與生命科學學院,海南海口
卷  號 45
發表年份 2017
發表刊期 19
發表頁面 126-129
關  鍵  字 萊茵衣藻;MAPK4基因;RNAi,
摘  要 [目的] 構建萊茵衣藻2A38的MAPK4基因的RNAi載體。 [方法]提取萊茵衣藻細胞總RNA,利用PCR擴增出編碼MAPK4的基因片段,用基因工程技術將MAPK4基因片段連接載體pMD18-T上,經過2次不同的雙酶切后,與RNAi中間載體pT282連接,最后連接到干涉載體pMaa7IR/XIR上,用酶切及測序鑒定MAPK4基因RNAi載體并轉化萊茵衣藻。 [結果]經限制性內切酶酶切及測序鑒定,證實為重組質粒,并且該重組載體可在萊茵衣藻中表達。 [結論]構建的MAPK4基因RNAi載體結構正確,為進一步利用RNAi技術使MAPK4基因沉默表達,研究MAPK4在萊茵衣藻中的生物學功能奠定了試驗基礎。
附  件 萊茵衣藻MAPK4基因RNAi載體的構建及鑒定
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