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2016年11期
中華根瘤菌NP1亞硝酸鹽還原酶基因的表達和酶學性質研究
| 作 者 | 袁會蘭，邊晨凱，陳度宇，張宇，許雷 |
| 第一作者 | 袁會蘭 |
| 作者單位 | 中國農業科學院研究生院，北京 |
| 卷 號 | 44 |
| 發表年份 | 2016 |
| 發表刊期 | 11 |
| 發表頁面 | 132-134，164 |
| 關 鍵 字 | 中華根瘤菌；亞硝酸鹽還原酶；原核表達；NO-2生物清除, |
| 摘 要 | ［目的］研究中華根瘤菌NP1（Sinorhizobium sp.NP1）中亞硝酸鹽還原酶基因（nir）的原核表達情況以及粗酶液的化學性質。［方法］構建該基因的原核表達載體pET32anir，然后對重組蛋白質進行SDS-PAGE和Western blotting分析獲得NIR酶在原核生物中的表達情況。通過測定粗酶液對亞硝酸鹽降解情況研究相關酶學性質。［結果］SDS-PAGE檢測結果表明，可溶性融合表達產物約為57 ku，其中亞硝酸鹽還原酶大小約40 ku，與酶分子量的預估值一致；Western blotting證實該蛋白可與根據亞硝酸鹽還原酶合成的多克隆抗體發生強陽性反應；酶學性質分析表明，亞硝酸鹽還原酶活力約為247.15 U/mL，最適pH 6.5，最適反應溫度37 ℃，該酶對NaCl的耐受性為0.3 mol/L。［結論］亞硝酸鹽還原酶蛋白重組質粒能在大腸桿菌系統中高效表達，研究其酶學性質為NO-2生物清除提供了技術保障。 |
| 附 件 |
中華根瘤菌NP1亞硝酸鹽還原酶基因的表達和酶學性質研究
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