作 者 | 張慶勛,劉新生,方玉珍,王永錄,張永光 |
第一作者 | 張慶勛 |
作者單位 | 中國農業科學院蘭州獸醫研究所,家畜疫病病原生物學國家重點實驗室,甘肅蘭州 |
卷 號 | 43 |
發表年份 | 2015 |
發表刊期 | 26 |
發表頁面 | 21-23,72 |
關 鍵 字 | 口蹄疫病毒;衣殼蛋白;檢測 |
摘 要 |
通過限制性酶切位點將P12A和3C基因插入到帶有雙啟動子(Pp10 和PPH)的桿狀病毒表達載體pFastBacTMDual,轉化E.coli DH10感受態細胞進行藍白斑篩選,將鑒定正確的重組桿狀病毒質粒轉染Sf9細胞后收獲重組桿狀病毒rBacDualP12A3C,通過間接免疫熒光(IFA)和蛋白質印跡(Westernblot)檢測衣殼蛋白的表達。IFA結果表明表達產物能夠被A型FMDV豬抗陽性血清所識別,鑒定正確并具有良好反應原性。Westernblot檢測到81 kD(P12A)、57 kD(VP0+VP3)、47 kD(VP3+VP1)、33 kD(VP0)和24 kD(VP1/VP3)5條蛋白條帶,與預期相符。該研究為進一步研究A型口蹄疫病毒空衣殼的體外組裝提供了試驗依據。 |
附 件 |
口蹄疫病毒A型AF/72株衣殼蛋白在昆蟲細胞中的表達及鑒定![]() |
注:若需下載,請右鍵單擊另存 |