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2015年16期
豬帶絳蟲組織蛋白酶B基因的克隆表達及抗血清的制備
| 作 者 | 孫銘苑， 方懷盛， 才學鵬 |
| 第一作者 | 孫銘苑 |
| 作者單位 | 中國農業科學院蘭州獸醫研究所，家畜疫病病原生物學國家重點實驗室，甘肅蘭州 |
| 卷 號 | 43 |
| 發表年份 | 2015 |
| 發表刊期 | 16 |
| 發表頁面 | 132-135 |
| 關 鍵 字 | 豬帶絳蟲；組織蛋白酶B；序列分析；原核表達；抗血清 |
| 摘 要 |
［目的］探索豬帶絳蟲組織蛋白酶B基因克隆、原核表達及抗血清制備的方法。［方法］ 根據從GeneDB獲得的豬帶絳蟲組織蛋白酶B的基因序列設計特異性引物，以豬帶絳蟲的cDNA為模板，擴增出豬帶絳蟲組織蛋白酶B基因的開放閱讀框。將去掉信號肽的部分進行了原核表達，用重組蛋白免疫青紫藍灰兔，并制備高效價抗血清。［結果］成功克隆了豬帶絳蟲組織蛋白酶B基因的開放閱讀框序列，將其命名為TscpB，長度為1 074 bp，編碼357個氨基酸，理論蛋白分子質量約為39.71 ku，具有組織蛋白酶B的特征結構域。采用大腸桿菌原核表達系統對目的蛋白進行大量表達，成功獲得了大小約38 ku的豬帶絳蟲組織蛋白酶B的重組蛋白，此目的蛋白以包涵體的形式存在。Western blotting表明，豬囊尾蚴病陽性血清可以與純化的重組蛋白發生特異性結合，說明被豬囊尾蚴感染過的豬血清中存在組織蛋白酶B的抗體。［結論］豬帶絳蟲組織蛋白酶B重組質粒能在大腸桿菌系統中高效表達，且該蛋白具有較高的免疫活性。 |
| 附 件 |
豬帶絳蟲組織蛋白酶B基因的克隆表達及抗血清的制備
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