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2015年13期
擬南芥CDR6 基因過表達載體構建及過量表達植株篩選鑒定
| 作 者 | 董萬春，樊婷婷，陽立波，江海坤，張其安，方凌，倪嬌嬌，管靈霞，曹樹青 |
| 第一作者 | 董萬春 |
| 作者單位 | 合肥工業大學生物與食品工程學院，安徽合肥 |
| 卷 號 | 43 |
| 發表年份 | 2015 |
| 發表刊期 | 13 |
| 發表頁面 | 63-64，104 |
| 關 鍵 字 | 擬南芥；CDR6基因；過量表達載體；轉基因植株 |
| 摘 要 |
［目的］以擬南芥為材料克隆CDR6基因，構建CDR6基因的過量表達載體并篩選鑒定獲得過表達植株。［方法］提取擬南芥mRNA，反轉錄成cDNA，并以此為模板克隆CDR6基因CDS全長，通過限制性內切酶切割、T4 DNA連接酶連接，將CDR6基因CDS全長連接到帶有35S強啟動子的pXB094載體上；然后轉化至Trans1T1感受態細胞中，菌落PCR鑒定陽性單克隆并測序確認。將重組質粒轉化至根瘤農桿菌GV3101菌株，通過浸花法侵染擬南芥野生型植株，通過抗性篩選和鑒定獲得預期的轉基因植株。［結果］菌落PCR鑒定和測序結果表明CDR6基因已成功構建至pXB094載體；通過抗性篩選并鑒定獲得了過量表達陽性植株。［結論］篩選和鑒定獲得的過量表達植株為研究CDR6基因的分子功能奠定了基礎。 |
| 附 件 |
擬南芥CDR6 基因過表達載體構建及過量表達植株篩選鑒定
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