線粒體DNA分子技術在斑點叉尾鮰物種鑒定中的應用

作  者 羅志萍,肖武漢,黃迎波,周慧平,袁曉芬,王華全
第一作者 羅志萍
作者單位 湖南出入境檢驗檢疫局,湖南長沙
卷  號 43
發表年份 2015
發表刊期 11
發表頁面 20-23
關  鍵  字 斑點叉尾鮰;物種鑒定;線粒體DNA
摘  要

 [目的]應對出口水產品國外技術貿易壁壘,建立一種能被國際上普遍接受的進出口水產品中斑點叉尾鮰物種真偽鑒定方法, 該方法也有助于我國水產品行業商業欺詐認定裁決工作。[方法]采用酚-氯仿抽提法提取水產品中基因組DNA,利用自行設計的引物DloopF/ DloopR,對斑點叉尾鮰及大口鲇、革胡子鯰、鯉和鯽等物種的線粒體DNA Dloop和COⅠ區進行PCR擴增測序比對,根據斑點叉尾鮰物種Dloop區的序列尋找其特異性酶切位點,對Dloop區進行酶切鑒定。[結果]]建立的DNA提取技術可以滿足水產品中線粒體Dloop擴增的要求,斑點叉尾鮰Dloop對應的最佳退火溫度為54.8℃, 其在Dloop序列的200 bp處有一特異性酶切位點EcoRⅠ。[結論]建立的斑點叉尾鮰產品中DNA提取、擴增技術及EcoRⅠ特異性酶切圖譜方法,不需測序就能夠將斑點叉尾鮰與其他近似物種區分開來,該方法適于進出口水產品貿易中斑點叉尾鮰產品的物種真偽鑒定。

附  件 線粒體DNA分子技術在斑點叉尾鮰物種鑒定中的應用
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