作 者 | 解銀麗,馬琪,李志勇 |
第一作者 | 解銀麗 |
作者單位 | 中國農業科學院蘭州獸醫研究所,家畜疫病病原生物學國家重點實驗室,甘肅蘭州 |
卷 號 | 43 |
發表年份 | 2015 |
發表刊期 | 8 |
發表頁面 | 95-97,135 |
關 鍵 字 | O型口蹄疫病毒;衣殼蛋白;重組桿狀病毒 |
摘 要 |
為構建并表達O型口蹄疫病毒( Footandmouth disease virus,FMDV)的空衣殼蛋白的重組桿狀病毒并鑒定其抗原性。以質粒pMD19P12A3C為模板,擴增出編碼O型FMDV衣殼蛋白前體P12A及其蛋白酶3C的P12A3C基因,插入至桿狀病毒轉移載體pFastBacDual PH啟動子下,構建出重組轉移載體pFastBacDualP12A3C,并轉化DH10BacTM大腸桿菌感受態細胞,構建重組轉座子BacmidP12A3C,將其轉染Sf9細胞,獲得表達O型FMDV衣殼蛋白的重組桿狀病毒rBacP12A3C。增殖重組桿狀病毒然后用其感染Sf9細胞,最后通過間接免疫熒光檢測外源蛋白的表達。結果表明,表達產物能夠被O型FMDV VP1多克隆抗體識別,并具有良好的反應原性,表明表達O型FMDV衣殼蛋白的重組桿狀病毒rBacP12A3C構建成功。該研究為進一步研究O型FMDV空衣殼的體外組裝提供前期實驗材料,并為后期研制出口蹄疫的基因工程亞單位疫苗奠定基礎。 |
附 件 | O型口蹄疫病毒衣殼蛋白在昆蟲細胞中的表達及其抗原性鑒定 |
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