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2014年20期
麻栗坡兜蘭ISSR引物篩選及反應體系的優化
| 作 者 | 高麗霞 |
| 第一作者 | 高麗霞 |
| 作者單位 | 河池學院化學與生物工程學院，廣西宜州 |
| 卷 號 | 42 |
| 發表年份 | 2014 |
| 發表刊期 | 20 |
| 發表頁面 | 6553-6555 |
| 關 鍵 字 | 麻栗坡兜蘭；ISSR-PCR；體系優化 |
| 摘 要 |
［目的］ 對麻栗坡兜蘭ISSR引物進行篩選，并建立一個穩定性高、重現性好、適合麻栗坡兜蘭ISSR反應體系。［方法］以麻栗坡兜蘭DNA為模板，分別對Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、DNA等PCR反應成分進行優化，并用優化的體系對25條蘭科中報道的ISSR引物進行篩選。［結果］確立了麻栗坡兜蘭最適ISSR-PCR反應體系：在25 μl反應體系中，Mg2+ 2 mmol/L、引物0.4 mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、DNA 1.5 μl、Taq酶1.4 U。利用該體系，共篩選得到10條ISSR引物用于麻栗坡兜蘭分析，并對21份麻栗坡兜蘭材料進行擴增，獲得了較好的擴增效果。［結論］該體系穩定可靠，為今后ISSR標記在兜蘭屬植物的種質鑒定、遺傳多樣性等方面的廣泛應用奠定了重要基礎。 |
| 附 件 |
麻栗坡兜蘭ISSR引物篩選及反應體系的優化
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