單鏈環狀DNA添加劑抑制基因表達序列分析Ditag聚合酶鏈反應引物多聚體生成

作  者 劉玉慧, 劉星, 劉學東, 鄭冬
第一作者 劉玉慧
作者單位 東北林業大學,黑龍江哈爾濱
卷  號 42
發表年份 2014
發表刊期 15
發表頁面 4576-4578,4601
關  鍵  字 單鏈環狀DNA(sscDNA);系列基因表達分析(SAGE);引物多聚體;抑制
摘  要

 [目的]研究利用單鏈環狀DNA抑制聚合酶鏈反應(PCR)副產物的作用效果。[方法]設計并合成單鏈環狀DNA,并以具同樣序列發卡狀結構的單鏈DNA為對照組,在基因表達序列分析(SAGE) Ditag PCR反應中加入上述不同濃度的DNA,利用電泳技術檢測不同結構(環狀/單鏈)以及不同濃度單鏈DNA對PCR多聚體附產物的抑制作用。[結果]發卡狀結構的單鏈DNA無法抑制PCR引物多聚體副產物的產生;而在70~150 nmol/L終濃度范圍內,單鏈環狀DNA可以抑制SAGE Ditag PCR反應中引物多聚體的生成,并且不影響SAGE不同tag間的表達豐度差異。[結論]單鏈環狀DNA可以作為PCR反應中引物多聚體生成的有效抑制劑。

附  件 單鏈環狀DNA添加劑抑制基因表達序列分析Ditag聚合酶鏈反應引物多聚體生成
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