［目的］建立同時測定藏藥手掌參中天麻素、dactylorhin A和militarine的含量測定方法。［方法］采用反相高效液相色譜法（RPHPLC），以ZORBAX SBC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色譜柱；進樣10 μl；乙腈-濃度0.5%的磷酸水梯度洗脫（0 min，7%；10 min，15%；20 min，20%；25 min，23%；30 min，40%；35 min，40%）；流速為0.7~1.0 ml/min；柱溫30 ℃；檢測波長222 nm。［結果］在35 min內完成對3種抗AD活性成分的分析，各成分之間均達到基線分離。天麻素、dactylorhin A和militarine的線性范圍分別為：0.031 34~1.003 00 mg/ml（R=0.999 8）、0.038 06~1.218 00 mg/ml（R=0.999 6）、0.039 28~1.257 00 mg/ml（R=0.999 6）；平均加樣回收率（n=6）分別為98.88%、99.91%和100.48%。測定得青藏高原15個不同地區不同種屬的手參中3種抗AD活性成分的含量，以互助變異手參的含量最高。［結論］該方法建立的HPLC分析方法簡單準確，能快速測定手參中有效成分的含量，青藏高原不同地區不同種屬手參中3種抗AD活性成分含量差異較大。