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2013年35期
布魯氏菌新型疫苗的構建表達和免疫原性檢測研究
| 作 者 | 李向陽，王學理，劉凱，霍曉偉，武迎紅，張顯華，張嘉保 |
| 第一作者 | 李向陽 |
| 作者單位 | 內蒙古民族大學成人教育學院，內蒙古通遼 |
| 卷 號 | 41 |
| 發表年份 | 2013 |
| 發表刊期 | 35 |
| 發表頁面 | 13483-13485，13491 |
| 關 鍵 字 | 布魯氏菌新型疫苗；表達；免疫原性 |
| 摘 要 |
［目的］探討布魯氏菌新型疫苗的構建表達和免疫原性檢測。［方法］該研究所選的 L7/L12 核蛋白為公認的 T 細胞保護性抗原。它具有高度的保守性。通過試驗，驗證 17.3 kDa 蛋白是否具有保護作用。同時，對翻譯起始因子 3 蛋白進行抗原預測。［結果］從布魯氏菌中提取其全基因組 DNA，測序正確后分別克隆至原核表達載體 PET32a(+)上，經誘導表達出相應的重組蛋白，WB 鑒定后純化待用；同時，編碼基因克隆至真核表達載體 PCDNA3.1(+)上，將重組質粒轉染 COS7 細胞后經 WB 證實重組質粒構建成功。將重組蛋白混合弗氏佐劑免疫動物，同時 DNA 疫苗以 PUMVC1mGMCSF 重組質粒為佐劑（各 100 μg/只）肌肉免疫動物；每 15 d免疫1次，加強免疫3次后檢測免疫應答指標，并且進行組間比較。采取ELISA法檢測到較高滴度的特異性抗體，WB 也證實特異性抗體的產生。［結論］該研究成功構建了布魯氏菌基因工程疫苗，在國內尚屬首次。利用流式細胞儀的分型技術和 ELISPOT 法評價布魯氏菌疫苗的細胞免疫指標，將促進我國獸用疫苗及相關產品的實驗室質控標準方法的建立和發展，為其臨床應用奠定基礎。 |
| 附 件 |
布魯氏菌新型疫苗的構建表達和免疫原性檢測研究
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