煙草DXS基因的克隆及其亞細胞定位分析

作  者 李尊強,王春軍, 楊愛國,丁安明,馮全福,徐劍,焦惠鵬,高堃宇
第一作者 李尊強
作者單位 牡丹江煙草科學研究所,黑龍江牡丹江
卷  號 41
發表年份 2013
發表刊期 30
發表頁面 11957-11960
關  鍵  字 1脫氧木酮糖5磷酸合成酶(DXS);綠色熒光蛋白(GFP);亞細胞定位;葉綠體
摘  要

 [目的]從煙草cDNA中擴增出1-脫氧木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)基因(去除終止密碼子TAA),并對其進行亞細胞定位分析。[方法]利用RTPCR技術分離、克隆DXS,將煙草DXS基因與綠色熒光蛋白(GFP)基因重組構建亞細胞定位表達載體,轉入根癌農桿菌LBA4404后注射侵染本氏煙煙草幼苗進行瞬時表達;并利用激光共聚焦掃描顯微鏡觀察轉GFP植株的表達情況。[結果]顯微鏡觀察發現,DXS和GFP融合蛋白僅在本氏煙葉肉細胞(尤其是保衛細胞)的葉綠體中產生綠色熒光,DXS基因在葉綠體中特異表達。[結論]DXS定位在葉綠體中,為接下來對DXS基因功能研究提供了理論依據。

附  件 煙草DXS基因的克隆及其亞細胞定位分析
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