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2013年18期
MCL1原核表達載體構建及重組蛋白表達
| 作 者 | 余美華，張姝芳，倪曉敏，袁進強，胡巧玲，萬文彬，楊仙玉 |
| 第一作者 | 余美華 |
| 作者單位 | 浙江農林大學動物科技學院，浙江臨安 |
| 卷 號 | 41 |
| 發表年份 | 2013 |
| 發表刊期 | 18 |
| 發表頁面 | 7742-7744，7977 |
| 關 鍵 字 | MCL 1；原核表達載體；重組蛋白表達 |
| 摘 要 |
［目的］構建日本蟾蜍（Bufo japonicus formosus）髓細胞白血病基因1（myeloid cell leukemia1，mcl1）的原核表達載體并誘導其重組蛋白表達。［方法］通過PCR方法擴增日本蟾蜍皮膚mcl1開放閱讀框，將其插入到原核表達載體pET28b中。經菌落PCR、DNA限制性內切酶消化篩選陽性克隆，并通過DNA測序確定原核表達載體pET28bmcl1構建成功。將pET28bmcl1轉入大腸桿菌（E.coli ）感受態細胞BL21（DE3）中，用IPTG誘導表達，并用SDSPAGE對重組蛋白的表達進行檢測。［結果］原核表達載體pET28bmcl1構建成功；重組蛋白在大腸桿菌中成功表達。［結論］原核表達載體的構建及重組蛋白的表達，為后續MCL1的純化、抗血清的制備及生理功能檢測奠定了基礎。 |
| 附 件 |
MCL1原核表達載體構建及重組蛋白表達
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