2023年11期

白術葉片DNA提取方法的優化

作  者 蔣小剛,王華,周武先,由金文,張美德
第一作者 蔣小剛
作者單位 湖北省農業科學院中藥材研究所農業農村部中藥材生物學與栽培重點實驗室,湖北恩施
卷  號 51
發表年份 2023
發表刊期 11
發表頁面 128-131
關  鍵  字 白術;DNA;提取方法;改良CTAB法
摘  要 [目的]優化白術葉片DNA提取方法,提取高質量DNA,用于分子生物學研究。[方法]以白術葉片為材料,比較常規CTAB法、改良CTAB法、SDS法、試劑盒法提取DNA的效果,并對改良CTAB法中的裂解溫度、裂解時間、核分離液解離次數進行優化,用瓊脂糖凝膠電泳和微量核酸測定儀檢測DNA的濃度和純度。最后通過ISSR-PCR驗證優化的改良CTAB法提取DNA的效果。[結果]4種方法中,改良CTAB法提取白術葉片DNA效果最好。針對葉片的改良CTAB法的優化條件為裂解溫度65 ℃、裂解時間20 min、解離次數2 次;ISSR-PCR驗證結果表明擴增條帶清晰穩定,無拖尾。[結論]優化后的改良CTAB法提取白術葉片DNA質量高,可用于白術種質資源遺傳多樣性分析。
附  件 白術葉片DNA提取方法的優化
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