摘 要 |
[目的]篩選適合我國北方冬春季秸稈降解的高效低溫纖維素降解菌株。[方法]在低溫地區采集土壤,10 ℃初篩耐低溫菌株,通過剛果紅染色液法進行復篩,利用DNS法測定CMC酶活性。將篩得菌株和實驗室自存菌株結合拮抗試驗構建復合菌系,測定復合菌系CMC酶活性,測定秸稈降解率,并對代表性菌株進行產酶條件優化,對最終確定的復合菌系中的菌株進行分子生物學鑒定。[結果]10 ℃低溫培養初篩得到55株耐低溫菌株,剛果紅染色法復篩得到8株具有明顯水解圈的單菌株,其中包括細菌3株、真菌2株、放線菌3株,其中纖維素酶活性最高達到47.0 U/mL;根據拮抗試驗構建了2個復合菌系,其纖維素酶活性分別達到31.0和53.0 U/mL;秸稈降解試驗中,實驗室和沙袋法的復合菌系2對秸稈的降解率分別達31.8%和45.1%,顯著高于復合菌系1和對照組;對JGDZTX3進行產酶條件優化,確定最佳氮源為牛肉膏,培養溫度為10 ℃,培養時間為4 d,初始pH為7,在此條件下CMC酶活性達到66.5 U/mL,這4個條件對產酶均有顯著影響(P<0.05);對復合菌系2的4個未知菌株進行鑒定,鑒定結果分別為白蟻菌、葡萄球菌、長柄木霉、芬萊氏鏈霉菌。[結論]通過該試驗篩選得到的耐低溫可降解纖維素復合菌系有較強的纖維素分解能力,在北方低溫地區有良好的應用前景。 |