2020年05期

H9和H10亞型禽流感病毒二重RT-PCR檢測方法的建立

作  者 李丹,謝芝勛,李孟,羅思思,謝麗基,張民秀,黃嬌玲,范 晴,王 盛,謝志勤,鄧顯文,曾婷婷,張艷芳
第一作者 李丹
作者單位 廣西壯族自治區獸醫研究所, 廣西獸醫生物技術重點實驗室, 廣西南寧
卷  號 48
發表年份 2020
發表刊期 5
發表頁面 96-99
關  鍵  字 禽流感病毒;H9亞型;H10亞型;二重RT-PCR
摘  要 [目的]建立可同時鑒別檢測H9和H10亞型禽流感病毒(AIV)的二重RT-PCR檢測方法。[方法]根據GenBank中H9和H10亞型AIV的HA基因保守序列,分別設計2對特異性引物,優化引物之間的濃度與退火溫度等條件,建立了可同時鑒別檢測H9和H10亞型AIV的二重RT-PCR檢測方法。[結果]特異性試驗結果表明,該方法可以特異性擴增出H9和H10亞型AIV對應大小的目的條帶,而對其余亞型禽流感病毒及其他禽病病原體均未擴增出特異性條帶。同時,該檢測方法對H9和H10亞型AIV的擴增下限均為5×104拷貝/μL。臨床樣品的檢測結果表明其與病毒分離結果相一致(100%)。[結論]該研究建立的二重RT-PCR檢測方法特異性強、敏感性高,可在一管內同時鑒別檢測H9與H10兩種亞型AIV,為H9與H10亞型AIV的監測提供了技術支撐。
附  件 H9和H10亞型禽流感病毒二重RT-PCR檢測方法的建立
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