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2019年02期
擬南芥MDH2基因GFP載體構建及轉基因植株的篩選鑒定
| 作 者 | 王媛媛，韓洋洋，耿慶鎏，朱香豫，曹樹青，樊婷婷 |
| 第一作者 | 王媛媛 |
| 作者單位 | 合肥工業大學食品與生物工程學院，安徽合肥 |
| 卷 號 | 47 |
| 發表年份 | 2019 |
| 發表刊期 | 2 |
| 發表頁面 | 96-98 |
| 關 鍵 字 | 擬南芥；MDH2；載體；轉基因植株 |
| 摘 要 | ［目的］以野生型擬南芥為材料構建MDH2基因GFP載體及GFP轉基因植株，研究MDH2基因在植物響應鎘脅迫機制中的功能。［方法］通過提取野生型擬南芥的RNA，反轉錄成為cDNA，并以cDNA為模板，利用PCR擴增MDH2基因，將擴增所獲得MDH2基因和pXB94-GFP質粒雙酶切后連接，并轉化進大腸桿菌感受態細胞中,鑒定正確后再轉入農桿菌感受態細胞中，通過菌落PCR鑒定出陽性單菌落。再通過浸花法轉入野生型擬南芥中，最后利用抗性篩選和PCR鑒定獲得MDH2轉基因陽性植株。［結果］ 成功克隆MDH2基因，并構建了MDH2GFP重組質粒，抗性篩選獲得了MDH2GFP轉基因植株。［結論］成功獲得MDH2GFP轉基因植株，為進一步研究該基因在植物響應鎘脅迫機制中的功能奠定了基礎。 |
| 附 件 |
擬南芥MDH2基因GFP載體構建及轉基因植株的篩選鑒定
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